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PAS糖原染色

更新時(shí)間:2024-09-26

簡要描述:

PAS糖原染色(Periodic Acid-Schiff stain)在組織學(xué)上,主要用來檢測(cè)組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個(gè)碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色。

PAS糖原染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。

原理:過碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛,再與Schiff氏液的無色品紅結(jié)合,紅色,定位于胞漿上。


PAS糖原染色方法:

固定液

Carnoy固定液: 純

無水乙醇60 ml 冰醋酸10ml,也可以選用75%無水乙醇。


PAS糖原染色液配制

1) 過碘酸酒清夜配法:

過碘酸(HIO4·2H2O) 0.4g 95%  無水乙醇 35ml M/5醋酸鈉(2.72g+蒸餾水100ml) 5ml蒸餾水10ml。

保存于冰箱內(nèi),用棕色瓶,可用兩周。


2)Schiff氏液:0.5克堿性品紅加入100毫升蒸餾水中,時(shí)時(shí)搖動(dòng)三角瓶5分鐘,使之充分溶解。冷卻至50℃后過濾加入10毫升1N鹽酸,冷卻至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸鈉,在室溫中至少靜置24小時(shí),然后密封冰箱保存。


3) Schiff氏  無水乙醇配置 Schiff氏液 11.5ml 1N HCI 0.5ml 純無水乙醇 23ml


4) 亞硫酸水 1%偏重亞硫酸鈉10ml 1N HCI 10ml 蒸餾水 180ml的樹膠溶解。


5)哈瑞或邁耶蘇木精


PAS糖原染色步驟:

1. 石蠟切片脫蠟至水(細(xì)胞涂片,冰凍切片直接水洗);


2. 蒸餾水洗;


3. 過碘酸酒清夜10min;


4. 自來水沖洗10min;


5. Schiff氏液10min;


6. 流水沖洗5min;


7.用哈瑞蘇木精或邁耶蘇木精染核3min(細(xì)胞核染色過深可用鹽酸酒精分化);


8. 流水沖洗5min;


9. 常規(guī)脫水、透明、封固。


結(jié)果

PAS陽性為紅色,細(xì)胞核藍(lán)色。


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